آزمون سمیت ژنی HPRT
الزام دریافت تأییدیه برای تجهیزات پزشکی، مواد اولیه، محصولات آرایشی و دارویی
خلاصه آزمون HPRT
زمینه و هدف: ارزیابی پتانسیل ژنوتوکسیک مواد و تجهیزات پزشکی یکی از الزامات اساسی در فرآیند ارزیابی زیستسازگاری بر اساس استاندارد ISO 10993-3 محسوب میشود. آزمون جهش ژنی HPRT (Hypoxanthine-Guanine Phosphoribosyl Transferase Assay) یکی از روشهای معتبر برای شناسایی جهشهای ژنی در سلولهای پستانداران بوده و بهطور گسترده در بررسی خطرات ژنتیکی ناشی از مواد شیمیایی، عصارههای تجهیزات پزشکی و فرآوردههای زیستی مورد استفاده قرار میگیرد. آزمون سمیت ژنی HPRT با ارزیابی جهشهای ایجادشده در ژن HPRT، توانایی ماده مورد مطالعه در القای تغییرات پایدار ژنتیکی را تعیین میکند و بهعنوان بخشی از راهبرد جامع ارزیابی سمیت ژنی در کنار سایر آزمونهای ژنوتوکسیسیته به کار میرود.
روش انجام: آزمون سمیت ژنی HPRT، سلولهای پستانداران نظیر CHO، V79 یا L5178Y در شرایط کنترلشده کشت داده شده و در معرض غلظتهای مختلف ماده یا عصاره مورد آزمون قرار میگیرند. ارزیابی معمولاً در دو شرایط، شامل حضور و عدم حضور سیستم فعالسازی متابولیکی S9، انجام میشود تا امکان شناسایی ترکیباتی که پس از متابولیسم فعال میشوند نیز فراهم گردد. پس از پایان دوره تماس، سلولها وارد مرحله بیان جهش شده و به مدت چند روز در محیط کشت نگهداری میشوند تا جهشهای القاشده تثبیت شوند. سپس سلولها در محیط انتخابی حاوی 6-Thioguanine کشت داده میشوند. تنها سلولهایی که در ژن HPRT دچار جهش شدهاند قادر به رشد و تشکیل کلنی خواهند بود. به موازات آن، شاخصهای سمیت سلولی شامل بقا، رشد نسبی و راندمان تشکیل کلنی نیز تعیین میشوند. استفاده از کنترل منفی، کنترل حلال و کنترل مثبت حاوی مواد جهشزای شناختهشده، اعتبار آزمون را تضمین میکند.
یافتهها و طبقهبندی: نتایج آزمون سمیت ژنی HPRT بر اساس فراوانی جهش (Mutation Frequency) و مقایسه آن با گروه کنترل ارزیابی میشود. افزایش معنیدار آماری و وابسته به دوز در تعداد کلنیهای مقاوم به 6-Thioguanine نشاندهنده وجود اثر جهشزایی است. بر اساس معیارهای پذیرفتهشده، نتایج آزمون در سه گروه طبقهبندی میشوند: «منفی» زمانی که افزایش معنیداری نسبت به کنترل مشاهده نشود؛ «مثبت» زمانی که افزایش پایدار، تکرارپذیر و وابسته به غلظت در فراوانی جهش مشاهده گردد؛ و «مبهم یا غیرقطعی» زمانی که پاسخ زیستی مشاهدهشده فاقد روند مشخص یا قابلیت تکرار کافی باشد. تفسیر نهایی علاوه بر فراوانی جهش، بر اساس میزان سمیت سلولی، کیفیت پاسخ دوز-اثر و تطابق با دادههای کنترل مثبت و منفی انجام میشود.
نتیجهگیری: تست سمیت ژنیHPRT یکی از مهمترین روشهای in vitro برای ارزیابی جهشهای ژنی در سلولهای پستانداران بوده و نقش کلیدی در شناسایی خطرات ژنتیکی بالقوه مواد مورد استفاده در تجهیزات پزشکی ایفا میکند. این آزمون توانایی بالایی در تشخیص جهشهای نقطهای و تغییرات ژنی پایدار داشته و اطلاعات ارزشمندی در خصوص ایمنی زیستی محصولات پزشکی فراهم میسازد. بر اساس الزامات ISO 10993-3، نتایج آزمون HPRT در کنار سایر آزمونهای ژنوتوکسیسیته برای ارزیابی جامع ریسک ژنتیکی و حمایت از ایمنی کاربرد بالینی تجهیزات پزشکی مورد استفاده قرار میگیرد.
واژگان کلیدی: ISO 10993-3، ژنوتوکسیسیته، آزمون HPRT، جهش ژنی، سمیت ژنتیکی، تجهیزات پزشکی، سلولهای پستانداران، 6-Thioguanine، ارزیابی زیستسازگاری، Mutation Frequency.
آزمون های مشابه
تصویر خلاصه آزمون
⚠️ الزامات قانونی
انجام آزمون جهش ژنی HPRT برای اخذ پروانه ساخت، تأییدیه و کد IRC از سازمان غذا و دارو جهت ورود به بازار ایران و بازارهای بینالمللی، برای تمامی تجهیزات پزشکی با تماس طولانی مدت (بیشتر از 24 ساعت) و تماس ایمپلنت (بیشتر از 30 روز) الزامی است. این آزمون به عنوان یکی از سه جزء اصلی باتری سمیت ژنی طبق استاندارد ISO 10993-3 (در کنار OECD 471 و OECD 473 یا 487) معرفی شده و نتایج آن برای تشخیص جهشهای ژنی در سلولهای پستانداران مورد پذیرش مراجع قانونی قرار میگیرد.
تست سمیت ژنی HPRT
⚠️ تکمیل و ارسال کلیه مدارک و فرمهای مورد نیاز پیش از ارسال نمونه به آزمایشگاه الزامی است. لطفاً مدارک را بهصورت کامل و صحیح ارسال نمایید. در صورت وجود نقص یا مغایرت در اطلاعات، فرآیند پذیرش نمونه، بررسی فنی و شروع آزمون با تأخیر مواجه خواهد شد.
⚠️ پیش از ارسال نمونه، لطفاً الزامات و شرایط حمل، نگهداری و بستهبندی نمونه را به دقت مطالعه نموده و جهت اطمینان از پذیرش صحیح نمونه، با واحد پذیرش آزمایشگاه هماهنگی لازم را انجام دهید.
⚠️ جهت دریافت هزینه دقیق و بهروز آزمونها، لطفاً فرم درخواست آزمون را از طریق پیامرسان بله یا ایمیل برای آزمایشگاه ارسال نمایید. درخواست شما توسط کارشناسان فنی بررسی شده و هزینه نهایی بر اساس نوع آزمون، تعداد نمونهها و الزامات مطالعه اعلام خواهد شد.
⚠️ گزارش نهایی آزمون پس از تکمیل تمامی مراحل آزمایش، بررسی نتایج و تأیید واحد کنترل کیفیت، در کوتاهترین زمان ممکن صادر شده و حداکثر ظرف 10 روز کاری در قالب گزارش رسمی انگلیسی به متقاضی تحویل خواهد شد.



